苏云金芽孢杆菌cry2 Aa操纵元蛋白对杀虫蛋白晶体形成作用的研究

被引：3

作者：

姚江

张杰

陈中义

李长友

黄大旸

宋福平

刘旭光

檀建新

机构：

[1] 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室

[2] 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京连云港师范高等专科学校连云港

[3] 北京

[4] 北京中国农业科学院生物技术研究所北京

来源：

微生物学报 | 2004年 / 01期

关键词：

苏云金芽孢杆菌; cry2Aa10操纵元; cry2Ab5基因; ORF2蛋白; 晶体形成;

D O I：

10.13343/j.cnki.wsxb.2004.01.026

中图分类号：

Q936 [微生物生物化学];

学科分类号：

071010 ;

摘要：

利用重叠PCR的方法 ,通过两次PCR扩增 ,分别获得cry2Aa1 0操纵元的orf1、orf1 +orf2与cry2Ab5基因的融合片段。融合片段经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切与pHT31 5连接 ,分别构建了基因融合片段的原核表达载体pFU(orf1 +2Ab)和pFU(orf1 +orf2 +2Ab) ,电转化Bt无晶体突变株 4Q7后 ,扫描电镜下可观察到典型的方形晶体 ,通过SDS PAGE可检测到 6 0kD大小的蛋白表达带。结果表明 ,cry2Ab5可在cry2Aa1 0的启动子帮助下有效转录和表达 ,并在orf2产物帮助下形成蛋白晶体

引用

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页数：4

共 4 条

[1]

分子克隆实验指南.[M].[美]萨姆布鲁克(Sambrook;J·)等著;金冬雁等译.科学出版社.1992,

[2] 苏云金芽孢杆菌沉默基因cry2Ab3在大肠杆菌中表达及杀虫活性研究 [J].

陈中义 ;

李长友 ;

刘加宝 ;

张杰 ;

黄大昉 .

微生物学报, 2002, (05) :561-566

[3] Cellular localization and characterization of the Bacillus thuringiensis Orf2 crystallization factor [J].

Staples, N ;

Ellar, D ;

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[4]

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