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木耳染色体DNA长度多型性分析
被引：1
作者：
边银丙
罗信昌
周启
王斌
机构：
[1] 华中农业大学应用真菌研究所
[2] 中同科学院遗传研究所
来源：
关键词：
木耳;
染色体;
多型性分析;
D O I：
10.13327/j.jjlau.1998.s1.035
中图分类号：
Q943 [植物细胞遗传学];
学科分类号：
071007 ;
090102 ;
摘要：
选用3个栽培菌株木耳XP10、YA和HE-1,单核体菌株X5和X9系来自XP10子实体耳片的单孢菌丝培养物,经亲和交配形成双核菌株X5×9.供试菌株菌丝体碎段在CYM液体培养基中培养2d,用1.5％溶壁酶制备原生质体.收集原生质体,用ST缓冲液将原生质体浓度调至4×10～8/mL以上,再与等体积的1％低融点琼脂糖（50℃）混匀,凝固的原生质体包埋块在含蛋白酶K的NDS缓冲液中酶解48h,供点样用.CHEF分析在BIO Rad公司CHEFMapper装置上进行.电泳组合条件为:1％脉冲电泳级琼脂糖,0.5×TBE,14℃,120°,15s at4V/cm for 30 min,75 s at 4V/cm for 18 h,150 s at 3V/cm for 24 h,200 s at 1.5V/cm for72h,1500 s at 2V/cm for 36 h,3600 s at 1.5V/cm for 72h.分子量标记样品为粟酒裂殖酵母[Schizosaccharomyces pombe927h_菌株（Bio-rad公司）和酿酒酵母[saccharomyces serevisaeYPH755菌株（Boehringer Manheim公司）].在上述电泳条件组合下,单核体X5和X9均分离出分子量相同的9条染色体DNA带,基因组大小估计为22000kb,染色体DNA带分子量在800-5800kb范围内.来自亲本X5和X9的同源染色体在异核体X5×9中不能完全同步迁移.双核体XP10、YA、HE1和X5×9显示出染色体长度多型性（CLPs）,这种多型性主要反映在分子量最小的2条染色
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