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tPA基因局部定位转染抑制兔动脉损伤后内膜增生的研究.[J].吴忠均;冯虎翼;李德卫;时德;郑树森.细胞与分子免疫学杂志.2005, 02
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tPA和VEGF165基因共表达质粒对人血管细胞增殖的影响和纤溶作用
被引：4
作者：
吴忠均
时德
骆旭东
郑树森
机构：
[1] 浙江大学附属第一医院器官移植中心,重庆医科大学附属第一医院血管外科,重庆医科大学附属第一医院血管外科,浙江大学附属第一医院器官移植中心浙江杭州,重庆,重庆,浙江杭州
来源：
关键词：
组织纤溶酶原激活物;
血管内皮生长因子;
共表达质粒;
血管内皮细胞;
血管平滑肌细胞;
D O I：
暂无
中图分类号：
R346 [];
学科分类号：
摘要：
目的:观察组织纤溶酶原激活物(tPA)和血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)基因共表达质粒在血管平滑肌细胞(VSMC)中的表达,并研究表达产物对血管内皮细胞(VEC)和VSMC增殖的影响和纤溶作用。方法:用脂质体转染法将tPA和VEGF165的共表达质粒pBudCE4.1/tPA-VEGF165转染VSMC,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)分别从mRNA水平和蛋白质水平检测tPA和VEGF165的表达;纤溶蛋白板法检测转染基因的VSMC培养基中tPA的纤溶活性;取转染pBudCE4.1/tPA-VEGF165质粒的VSMC培养基培养VEC和VSMC,用四甲基偶氮唑盐(MTT法)和流式细胞技术检测转基因VSMC的细胞培养基对VEC和VSMC增殖的影响。结果:pBudCE4.1/tPA-VEGF165转染VSMC后,RT-PCR和ELISA检测发现,tPA和VEGF165在mRNA和蛋白质水平均有表达;转基因培养基有明显促进纤溶和促VEC增殖作用,而对VSMC增殖无作用。结论:tPA和VEGF165基因共表达质粒pBudCE4.1/tPA-VEGF165能在VSMC表达有生物学活性的tPA和VEGF165,为tPA和VEGF165基因转染防治移植心脏内血管狭窄奠定了基础。
引用
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