环孢素A对肾小管上皮细胞转分化及CTGF表达的影响

目的观察环孢素A(CsA)对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)细胞转分化(EMT)及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨其致肾间质纤维化作用的可能机制。方法用相差显微镜观察不同浓度(0.5～25.0mg/L)CsA作用下HK-2细胞形态的变化;免疫荧光、RT-PCR、WesternBlot分别检测5mg/LCsA刺激细胞不同时间(24～72h)α-SMA在细胞内的表达和分布以及α-SMA、CTGFmRNA和蛋白的表达。结果显微镜下可见,HK-2细胞随CsA刺激浓度的增加由立方形铺路石样逐渐转变为梭形长条样。免疫荧光显示,随CsA刺激时间的延长细胞质中α-SMA表达逐渐增强。RT-PCR和WesternBlot显示,CsA呈时间依赖性上调α-SMA、CTGFmRNA和蛋白的表达,24h表达即明显增加,72h增加更为显著(P<0.01);CTGF与α-SMA表达的时间效应一致。结论环孢素A可上调CTGF的表达、诱导肾小管上皮细胞转分化,进而促进肾间质纤维化。