α-乙酰乳酸脱羧酶的基因克隆及在大肠杆菌和酿酒酵母中的表达

被引：5

作者：

秦玉静

高东

王祖农

机构：

[1] 山东大学微生物系微生物技术国家重点实验室!济南,中国科学院化学研究所,山东大学微生物系微生物技术国家重点实验室!济南,山东大学微生物系微生物技术国家重点实验室!济南

来源：

遗传学报 | 2000年 / 02期

关键词：

α－乙酰乳酸脱羧酶基因; 基因克隆; 表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q523 [脱氧核糖核酸（DNA）];

学科分类号：

摘要：

以ｐＵＣ１９质粒为载体，以Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９为受体，构建了含α一乙酰乳酸脱羧酶（α－ＡＬＤＣ）基因的地衣芽孢杆菌ＢａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓＡＳ１０１０６的基因文库，得到４８００个重组转化子中均含有４～１０ｋｂ的外源插入ＤＮＡ片段。从基因文库中筛选到６个阳性克隆，对其中１个克隆的α－乙酰乳酸脱羧酶基因片段进行亚克隆分析表明，该α－乙酰乳酸脱酶基因位于１．６ｋｂ的ＢａｍＨＩ－ＥｃｏＲＩ片段上。对其研究发现，α－乙酰乳酸脱酶基因在大肠杆菌中表达产生的乙酰乳酸脱羧酶在最适反应温度和ｐＨ值等与供体菌的酶活相当。利用大肠杆菌和酵母菌穿梭质粒ｐＹＥＳ２为载体，可以将α－乙酰乳酸脱羧酶基因引入酿酒酵母中，从而使重组酵母菌株具有降解啤酒发酵中生成的α－乙酰乳酸，减少双乙酰含量的能力。

引用

页码：165 / 169

页数：5

共 9 条

[1] A methed for screening diasetyl and acetoin-producing bacteria on agarplates. Phalip V,Schmitt P,Divies C. Journal of Basic Microbiology . 1994
[2] Molecular Clning, A Laboratory Manual 2ed. Sambrook J et al. . 1989
[3] Secretion of biologically active recombinant firbrinogen by yeast J. Samar N R et al. Biological Chemistry . 1995
[4] Gene cloning of chitinase Al from Bacillus circulans WL--12 revealed its evolutionaryrelationship to serratia chitinase and to the type homology units of fibromectin. Watanabe T et al. Journal of Biological Chemistry . 1990
[5] Transformation of intact yeast cells treaded with alkali cations. Ito ti Fukuda K,Murata A. Journal of Bacteriology . 1983
[6] Cloning of aldB, which encodes a --asetolactatedecarboxylase, an exoenzyme from Bacillus brevis. Diderichsen B,Wedsted U,Hedegaard L et al. Journal of Bacteriology . 1990
[7] On the occurrence of a--acetolactate decarboxylases among microorganism.Carsberg Res. Godtfredse S E. Communication . 1983
[8] Constrction of a brewer’s yeast having a-acetolactate decarboxylasegene from Acetobacter aceti subsp.sylinum integrated in the genome. Yamano S,Kondo K,Tanaka J et al. Journal of Biotechnology . 1994
[9] Cloning and expression of the gene encoding a--acetolastate decarboxylasefrom Acetobacter aceti subsp.xylinum in brewer’s yeast. Yamano S,Tanaka J,Inoue T. Journal of Biotechnology . 1994

← 1 →