从骨髓基质干细胞活性的改变探讨激素性股骨头坏死的肾阳虚本质

目的:探讨激素性股骨头坏死的肾阳虚本质。方法:在对6例创伤性股骨颈骨折患者(非激素性股骨头坏死组)和6例激素性股骨头坏死患者(激素性股骨头坏死组)行髋关节置换术前抽取其静脉血,采用放射免疫法测定血浆皮质醇和促肾上腺皮质激素的含量;行髋关节置换术时分别取其股骨上段骨骺处液态的红骨髓,建立骨髓基质干细胞的体外培养体系,细胞传代培养并经体外成骨诱导后,采用MTT法检测成骨细胞的光密度值,进行碱性磷酸酶染色并检测成骨细胞的碱性磷酸酶含量,采用VonKossa’s染色法进行成骨细胞矿化结节计数,并在显微镜下观察成骨细胞形态。结果:①血浆皮质醇含量和促肾上腺皮质激素含量。激素性股骨头坏死组患者的血浆皮质醇含量和促肾上腺皮质激素含量[(328.167±27.499)μg.L-1,(11.450±2.649)ng.L-1]均低于非激素性股骨头坏死组[(380.500±25.618)μg.L-1,(15.667±3.751)ng.L-1],差异有统计学意义(t=3.411,P=0.007;t=2.249,P=0.048)。②成骨细胞形态。随着培养时间的延长,成骨细胞由贴壁→相互融合成单层→多层重叠生长。成骨细胞碱性磷酸酶染色呈强阳性,细胞质中出现黑色、灰褐色颗粒状或片状沉淀;非激素性股骨头坏死组成骨细胞比激素性股骨头坏死组有不同程度的深染和范围扩大。Von Kossa’s矿化结节染色显示,成骨细胞呈集落生长后开始形成矿化结节,细胞间出现致密的、圆形不透光团块,呈现片状的棕染;非激素性股骨头坏死组成骨细胞矿化结节数比激素性股骨头坏死组明显增多。③成骨细胞光密度值、碱性磷酸酶含量及矿化结节数。激素性股骨头坏死组患者的成骨细胞光密度值、碱性磷酸酶含量、矿化结节数均低于非激素性股骨头坏死组[(0.174±0.035),(0.233±0.028),t=3.209,P=0.009;(1.685±0.323)U.L-1,(2.563±0.446)U.L-1,t=3.911,P=0.003;(18.000±3.578)个,(23.833±2.639)个,t=3.214,P=0.009]。结论:激素性股骨头坏死患者的下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱时,骨髓分化为成骨细胞的功能下降,成骨细胞的活性下降,这可能是激素性股骨头坏死患者肾阳虚在骨关节系统的具体体现,是大剂量激素导致肾阳虚并最终导致股骨头坏死的细胞学基础。