在甲醇酵母Pichia pastoris胞内表达有活性的辣根过氧化物酶

被引:5
作者
蒋太交
吉鑫松
章如安
袁中一
机构
[1] 中国科学院上海生物化学研究所!上海,中国科学院上海生物化学研究所!上海,中国科学院上海生物化学研究所!上海,中国科学院上海生物化学研究所!上海
关键词
辣根过氧化物酶; 毕赤酵母; 基因表达;
D O I
10.13865/j.cnki.cjbmb.2000.02.011
中图分类号
Q55 [酶];
学科分类号
071010 ; 081704 ;
摘要
为了开辟在甲醇酵母 Pichia pastoris中表达 HRP的新途径 ,将编码成熟 HRP同功酶 C基因克隆到表达载体 p PIK3.5K中 .p PIK3.5KHRP转化 GS1 1 5后 ,用 PCR筛选阳性 P.pastoris重组株 ,并用甲醇进行诱导 . Western印迹杂交分析表明目标蛋白 (约为 38k D)能被天然 HRP的多克隆抗体所识别 ,因此活性辣根过氧化物酶已在 P.pastoris胞内表达 .筛选菌株中显示了明显的过氧化物酶活性 ,同时诱导过程中血红素和 Ca Cl2 的加入对过氧化物酶的活力影响不大
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