高通量人乳头瘤病毒分型基因诊断方法的研究

目的　建立一种可靠、简便经济、快速、高通量的人乳头瘤病毒 (HPV)分型检测新方法 ,并推向临床应用。方法　以各型HPV通用引物行聚合酶链反应 (PCR)扩增 12 7例患者的尖锐湿疣组织和宫颈刮片 ,将荧光偏振检测技术与模板指导的末端延伸反应 (TDI FP)结合 ,应用探针杂交延伸反应对临床样本扩增产物进行HPV分型 :HPV6 ,11,16 ,18,31,33,35 ,5 8检测 ,并以DNA序列测定结果为参照。结果　在 78例患者的尖锐湿疣组织块中HPV检出率 10 0 %,其中两型混合感染 14例 ,占18%,三型混合感染 5例 ,占 7%,三型以上混合感染 1例。 49例患者的宫颈刮片HPV检出率为 77%,其中两型混合感染 6例 ,占感染者的 17%,三型混合感染 3例 ,占感染者的 8%,三型以上混合感染 1例。但DNA序列测定方法仅能检出单独一型感染 ,未检出多重混合感染 ,两法对单一型检出符合率10 0 %。结论　本研究初步建立了通用、特异、便捷 ,无需标记探针 ,可自动化高通量用于临床的人乳头瘤病毒分型基因诊断方法。