肺癌干细胞的球体形成与致瘤性分析

被引:22
作者
耿沁 [1 ]
董强刚 [1 ]
姚明 [2 ]
郑必强 [1 ]
胡晶莹 [3 ]
周瑾 [1 ]
赵仰星 [3 ]
闫明霞 [2 ]
甘愉 [3 ]
机构
[1] 上海交通大学上海市肿瘤研究所分子诊断实验室
[2] 上海交通大学上海市肿瘤研究所实验病理室
[3] 上海交通大学上海市肿瘤研究所免疫与分子生物学研究室
关键词
腺癌,细支气管肺泡; 细胞培养技术; 干细胞; 球体; 动物实验;
D O I
暂无
中图分类号
R734.2 [肺肿瘤];
学科分类号
100214 ;
摘要
目的:从人肺腺癌细胞株SPC-A1中诱导球体形成,对其中的肺癌干细胞进行鉴定并评估其致瘤能力。方法:无血清条件下培养肺癌细胞,采用表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、重组人胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth fac-tor-1,IGF-1)和重组人成纤维细胞生长因子-10(fibroblast growth factor-10,FGF-10)等细胞生长因子诱导球体形成,球体细胞采用RT-PCR及免疫荧光技术检测干细胞相关标志的表达,并通过NOD-SCID小鼠移植评估其致瘤性。结果:SPC-A1肺腺癌细胞经培养5~10d后,即可形成悬浮生长的细胞球体(肺球体)。RT-PCR检测显示肺球体细胞表达肺癌干细胞表面标志CD24和CD221,细支气管肺泡干细胞标志Clara细胞分泌蛋白和肺泡活性蛋白C,胚胎干细胞主干基因OCT4、Nanog和Bmi-1,以及肺干细胞主干基因甲状腺转录因子-1。采用免疫荧光检测其中3个标志的蛋白表达,证实80%以上的肺球体细胞呈Clara细胞分泌蛋白、肺泡活性蛋白C和OCT4染色阳性。肺球体细胞具有高致瘤性,在NOD-SCID小鼠中移植5103个细胞即可形成肿瘤。结论:肺球体细胞中肺癌干细胞高度富集并具有致瘤性。
引用
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共 2 条
[1]   人肺腺癌干细胞的分离及鉴定 [J].
董强刚 ;
姚明 ;
耿沁 ;
周瑾 ;
闫明霞 .
肿瘤, 2008, (01) :1-7
[2]  
The properties of a mammary gland cancer stem cell. Zucchi I,Sanzone S,Astigiano S,et al. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 2007