耐热芽孢杆菌E2菌株纤维素酶基因克隆的研究

被引：7

作者：

官家发，范成英，吴恰庆，张发群，江明，张义正

机构：

[1] 中国科学院成都生物研究所，四川大学生物工程系

来源：

遗传学报 | 1995年 / 04期

关键词：

芽孢杆菌E2菌株，羧甲基纤维素酶，基因克隆;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

用质位ｐＢＲ３２２作载体，大肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５αＦ＇作受体，克隆到耐热芽孢杆菌Ｅ２菌株的羧甲基纤维素酶（ＣＭＣａｓｅ）基因。重组质粒ｐＢＧ３从产生ＣＭＣａｓｅ的转化子中分离得到。克隆到的ＣＭＣａｒｅ基因位于４．０ｋｂＨｉｎｄＩＩＩ片段上。功能状态ＣＭＣａｓｅ基因被亚克隆到２．４ｋｂＤＮＡ片段上。同位素杂交结果显示出克隆到的ＣＭＣａｓｅ基因与供体菌染色体ＤＮＡ的亲合性。重组质粒ｐＢＧ３所表达的ＣＭＣａｓｅ的最适作用ｐＨ为６．５，最适作用温度为５５℃，不作用于任何实验过的天然纤维素。含重组质粒ｐＢＧ３的转化子产生的纤维素酶在细胞中的分布为：胞内占８２．９％，胞外占７．９％，质壁空间（ｐｅｒｉｐｌａｓｍｉｃｓｐａｃｅ）占９．２％。

引用

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