通过农杆菌介导法将哈兹木霉几丁质酶ThEn-42基因导入核桃

被引:32
作者
汤浩茹
Wallbraun M
任正隆
Reustle G.M
Krczal G
机构
[1] 四川农业大学林学园艺学院!雅安德国莱茵兰—法尔兹植物生物技术中心
[2] Neustadt/W
[3] 德国莱茵兰—法尔兹植物生物技术中心!Neustadt/W
[4] 四川农业大学林学园艺学院!雅安
[5] 德国莱茵兰—法尔兹植物生物技术
关键词
核桃; 几丁质酶; 转基因; 体细胞胚;
D O I
暂无
中图分类号
S664.1 [核桃(胡桃)]; Q943.2 [植物基因工程];
学科分类号
090201 ; 071007 ; 090102 ;
摘要
通过根癌农杆菌C58C1ATHVRifR 介导法 ,利用烟草花叶病毒 35S双启动子和苜蓿花叶病毒引导序列控制下的含抗新霉素磷酸转移酶基因 (nptⅡ )和哈兹木霉几丁质酶基因(ThEn 4 2 )的质粒pBin19ESR为载体 ,对 3个核桃体细胞胚系进行遗传转化 ,结果获得 4 1个抗卡那霉素的体细胞胚系。经PCR和复式PCR检测 ,4 1个转化系均含有nptⅡ基因 ,其中 38个转化系含有ThEn 4 2基因。Southern杂交分析表明 ,ThEn 4 2基因已被整合到核桃体的基因组中。几丁质酶活性检测结果表明 ,转化的体细胞胚系的几丁质酶活性比对照高几十至几千倍。遗传转化的体细胞胚系已萌发成苗
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