共 1 条
抗CD71人-鼠嵌合抗体(D2C)的构建和表达
被引:5
作者:
王硕
蒋琳
叶庆
朱慧芬
杨敬
邵静芳
沈关心
机构:
[1] 江汉大学医学与生命科学学院
[2] 华中科技大学同济医学院免疫学研究所免疫学系
[3] 华中科技大学同济医学院免疫学研究所免疫学系 武汉
[4] 武汉
来源:
关键词:
CD71;
人鼠嵌合抗体;
构建;
表达;
D O I:
暂无
中图分类号:
R392 [医学免疫学];
学科分类号:
100102 ;
摘要:
目的 :构建抗CD71人 鼠嵌合抗体的真核细胞表达载体并在真核细胞中表达嵌合抗体。方法 :将鼠源性抗CD71单抗 (75 79)重、轻链可变区基因 (VH 和VL)分别克隆至含有人IgG轻、重链恒定区的表达载体pγ Expr和pκ Expr中 ;将嵌合表达载体 (Chi75 79 pγ Expr和Chi75 79 pκ Expr)经电转染技术共转染至真核细胞 (SP2 0 )中。结果 :经ELISA法检验阳性转染瘤细胞培养上清 ,证明其表达蛋白产物中同时具有人IgG重链恒定区 (Cγ)和轻链恒定区 (Cκ)蛋白 ;通过间接免疫荧光流式细胞术 (FCM)和间接免疫荧光显微技术 ,证明该表达产物能够特异性识别和结合表达于靶细胞表面的CD71分子。结论 :抗CD71人 鼠嵌合抗体 (D2C)在体外真核细胞表达成功。
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