白细胞介素1、肿瘤坏死因子α和脂多糖对人脐静脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1的影响

目的　观察细胞因子白细胞介素 1(IL 1) β、肿瘤坏死因子 (TNF)α和脂多糖 (LPS)是否诱导人脐静脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)mRNA及蛋白。方法　选取生长汇合的人脐静脉内皮细胞 ,在其培养基中分别加入终浓度为 2ng ml的IL 1β、2 0ng ml的TNFα和 10 0ng ml的LPS ,37℃共育 4h后 ,按照一步法提取其总RNA ,用γ 32 P标记的寡核苷酸探针进行dotblot分析 ,观察其MCP 1mRNA表达 ,另一部分培养 2 4h ,收集长满细胞的盖玻片 ,用免疫细胞化学法及图像分析系统检测细胞内的MCP 1蛋白质表达。结果　培养的人脐静脉内皮细胞能低水平地表达MCP 1mRNA和蛋白质。IL 1β、TNFα及LPS均能增加MCP 1mRNA的表达 (分别是对照组的 7.8倍、2 .6倍及 1.2倍 )。免疫细胞化学显示 ,各组细胞对MCP 1多克隆抗体均显示阳性反应。图像扫描显示 ,LPS组、TNFα组及IL 1β组细胞的平均吸光度 (A)值分别为 0 .0 78± 0 .113、0 .10 2± 0 .0 0 5和 0 .117± 0 .0 10 ,均明显高于对照组 (0 .0 5 1± 0 .0 0 4) ,差异有显著性 (F =193.2 5 ,P <0 .0 1)。结论　IL 1β和TNFα均能显著增强内皮细胞MCP 1mRNA和蛋白的表达 ,提示它们通过诱导内皮细胞产生MCP 1,吸引单核细胞迁入动脉内膜而参与动脉粥样硬化的发生和发展。