罗氏沼虾诺达病毒TAS-ELISA检测法的建立及应用研究

被引：18

作者：

钱冬 ^{[1
]}

刘问 ^{[2
]}

潘晓艺 ^{[2
]}

曹铮 ^{[2
]}

于涟 ^{[3
]}

机构：

[1] 浙江大学生物医学工程与仪器科学学院

[2] 浙江省淡水水产研究所

[3] 浙江大学动物预防医学研究所

来源：

浙江大学学报(农业与生命科学版) | 2006年 / 04期

基金：

浙江省自然科学基金;

关键词：

罗氏沼虾肌肉白浊病; 罗氏沼虾诺达病毒; TAS-ELISA; 应用;

D O I：

暂无

中图分类号：

S945.4 [各种虾的病虫害及其防治];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

罗氏沼虾肌肉白浊病(Whitish muscle diseases ofMacrobrachium rosenbergii)是近年来流行于罗氏沼虾苗种阶段的严重疾病,该病病原已确定为罗氏沼虾诺达病毒(Macrobrachium rosenbergiiNodavirus,MrNV).作者在病毒超离提纯的基础上,制备了罗氏沼虾诺达病毒兔抗血清,并应用抗罗氏沼虾诺达病毒单克隆抗体2B5,建立了三抗体夹心酶联免疫检测方法(TAS-ELISA).TAS-ELISA最适反应条件为:兔抗体以1μg/mL包板,小鼠单抗2B5的工作浓度为1∶50000,该法检测MrNV的灵敏度达0.98 ng,对WSSV、TSV及其他细菌感染死亡的罗氏沼虾苗没有非特异性反应.通过对2000—2002年病虾及疑似病虾的病毒检测,表明TAS-ELISA法比间接ELISA法和核酸电泳法有更高的阳性检出率和符合率;此外还摸索了降低孵育温度和缩短孵育时间对病毒检测的影响,表明各步孵育温度和时间分别为25℃和20 min对于白浊症状的病苗检测无明显影响,使得本法更加适合于生产实践.

引用

页码：377 / 382

页数：6