高压氧预处理对体外大鼠脑小胶质细胞产生细胞因子的影响(英文)

背景:高压氧可以减轻脑组织的缺血再灌注损伤,这种作用与高压氧对小胶质细胞的调节作用有着密切的联系。目的:探讨高压氧对体外大鼠脑小胶质细胞活性、分泌产生白细胞介素1、肿瘤坏死因子α和一氧化氮的影响。设计:完全随机分组设计,对照实验。单位:上海第二军医大学海医系潜水医学教研室、免疫教研室、病理教研室、实验动物中心。材料:实验于1999-05/2000-01在解放军第二军医大学潜水医学实验室及免疫教研室完成。实验选用新生1日龄SD大鼠30只。方法:①用消化法培养新生SD大鼠的脑组织小胶质细胞。非特异性酯酶染色及细胞免疫化学染色鉴定小胶质细胞。②原代小胶质细胞按2×105/孔浓度接种于48孔培养板,将小胶质细胞随机分以下5组:对照组未经高压氧处理;高压氧(0.2MPa1h)预适应3,7,10,14d组。经各时程高压氧处理后,随机分成2大组,其中一组细胞培养液添加细菌脂多糖(激活小胶质细胞)1mg/L,另一组则不添加。③白细胞介素1活性测定采用胸腺细胞增殖法。肿瘤坏死因子α活性测定采用L929细胞的细胞毒性试验。以Griess法测定亚硝酸的含量代表一氧化氮含量。④两样本比较采用未配对计量资料t检验。主要观察指标:不同时程高压氧预处理后大鼠脑小胶质细胞在静息和激活不同状态下白细胞介素1、肿瘤坏死因子α活性和一氧化氮含量。结果:SD大鼠30只均进入结果分析。①静息小胶质细胞细胞外液白细胞介素1、肿瘤坏死因子α活性和一氧化氮含量:各组间差异不明显。②脂多糖激活的小胶质细胞细胞外液白细胞介素1活性和一氧化氮含量:高压氧预处理10和14d组明显低于对照组[10d组:0.409±0.014,(5.21±0.77)μmol/L;14d组:0.381±0.004,(4.93±1.02)μmol/L,P<0.05]。③脂多糖激活的小胶质细胞细胞外液肿瘤坏死因子活性:高压氧预处理14d组明显低于对照组[(51.20±1.13)%,(70.10±2.26)%,P<0.05]。结论:0.2MPa的高压氧预处理可抑制活化小胶质细胞分泌产生白细胞介素1、肿瘤坏死因子α和一氧化氮,但对于静息小胶质细胞无明显作用。