联合应用重组人骨保护素和阿伦膦酸钠抑制成熟破骨细胞的体外实验研究

被引：13

作者：

黄鹏

王岩

迟志永

杨子义

倪健

杨武剑

王冉东

白金柱

机构：

[1] 中国人民解放军总医院骨科

[2] 上海富纯中南生物有限公司

[3] 中国人民解放军总医院骨科北京

来源：

中华外科杂志 | 2005年 / 12期

关键词：

破骨细胞; 体外研究; 骨保护素; 阿伦膦酸钠;

D O I：

暂无

中图分类号：

R68 [骨科学（运动系疾病、矫形外科学）];

学科分类号：

1002 ; 100210 ;

摘要：

目的研究联合应用重组人骨保护素(rhOPGFc)和阿伦膦酸钠(ALN)对破骨细胞抑制作用。方法进行人类OPGFc融合蛋白毕赤酵母表达株的构建和鉴定。酶消化法获取新生小鼠颅骨成骨细胞,与破骨细胞前体细胞RAW264.7按照4∶1比例混合,培养于96孔板中。9d后,重酒石酸盐抗酸性磷酸酶染色(TRAP染色)鉴定后,分别使用10-5g/LrhOPGFc、10μmol/LALN、10-5g/LrhOPGFc+10μmol/LALN、5×10-6g/LrhOPGFc+5μmol/LALN作用于混合细胞体系,并设空白对照。加药后3、7d观察破骨细胞数目和形态,计算单位面积内TARP阳性细胞个数,并行骨磨片吸收陷窝计数。结果重组人骨保护素(rhOPGFc)分子量与预期结果相符合,蛋白印迹检测(Westernblotting)显示,该条带可被抗免疫球蛋白IgG抗体别显色。小鼠成骨细胞与破骨细胞前体细胞RAW264.7混合培养后9d,体系中出现大量多核成熟破骨细胞,TARP染色证实为成熟破骨细胞。加药3、7d后,与对照组相比,其余各组破骨细胞TARP阳性细胞个数,骨磨片吸收陷窝计数均明显减少,以10-5g/LrhOPGFc+10μmol/LALN组减少最为显著。结论重组人骨保护素(rhOPGFc)可以有效减少成熟破骨细胞数目并抑制其功能。联合应用rhOPGFc和阿伦膦酸钠可以交互抑制成熟破骨细胞功能。

引用

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页数：5

共 3 条

[1] 激素性骨坏死骨质丢失与骨保护蛋白表达的相关研究 [J].