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Horseradishperoxidase gene expression in Escherichia coli .2 Egorov A M,Gazaryan I G,Savelyev S V,et al. Annals New YorkAcademy of Sciences . 1991
甲醇酵母Pichia pastoris高水平表达有活性的辣根过氧化物酶
被引：3
作者：
蒋太交
吉鑫松
章如安
黄艳红
吴祥甫
袁中一
机构：
[1] 中国科学院上海生物化学研究所!上海
来源：
关键词：
辣根过氧化物酶;
Pichiapastoris;
高糖基化;
D O I：
暂无
中图分类号：
Q55 [酶];
学科分类号：
摘要：
表达有活性的辣根过氧化物酶（ＨＲＰ） 不仅可以深入揭示ＨＲＰ 结构与功能及其生理作用规律， 而且为ＨＲＰ的广泛需要提供新的来源． 为了在甲醇酵母Ｐ． ｐａｓｔｏｒｉｓ 中成功表达， 将编码ＨＲＰ Ｃ成熟肽的ｃＤＮＡ 构建到ｐＰＩＣ９ 上， 再转化到Ｐ． ｐａｓｔｏｒｉｓ 中， 筛选到了分泌表达非糖基化ＨＲＰ 和高糖基化ＨＲＰ（ 分子质量超过１００ ｋｕ） 两种主要产物的重组细胞株． 优化表达条件， 目标产物在摇瓶发酵液中高效表达， 可达４～６ ｇ／Ｌ． 并且直接从发酵液中可获得具有活性的高糖基化ＨＲＰ， 每毫升发酵液中酶活力约有２ Ｕ， 经初步的纯化ＨＲＰ具有最大吸收峰４０３ ｎｍ ．
引用
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