菠菜乙醇酸氧化酶同工酶GO Ⅰ的纯化和特性

被引：9

作者：

徐杰

吴燕燕

机构：

[1] 华南师范大学生物技术研究所!广东广州

[2] 华南师范大学激光生命研究所!广东广州

来源：

热带亚热带植物学报 | 2001年 / 01期

基金：

广东省自然科学基金;

关键词：

乙醇酸氧化酶同工酶; 菠菜; 催化特性; 等电点; 分子量; 聚合态;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q946.5 [酶];

学科分类号：

071001 [植物学];

摘要：

从菠菜绿叶中获得ＳＤＳ－ＰＡＧＥ为４００００±２０００Ｍｒ单带的乙醇酸氧化酶同工酶ＧＯⅠ。其ＧＯ比活为８．４Ｕｍｉｎ－１ｍｇ－１　ｐｒｏｔｅｉｎ，经ＮＤ－ＰＡＧＥ后显示Ｍｒ为４７００００。用ＩＥＦ测得其等电位为７．４。用氧电极法证实该ＧＯⅠ能同时催化乙醇酸和乙醛酸的氧化。制备ＧＯⅠ的抗体并对菠菜绿叶粗蛋白作免疫双扩散，有免疫沉淀线；经蛋白Ａ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ柱吸附法和抗原亲和吸附法，得到单特异性ＧＯⅠ抗体。用该ＧＯⅠ抗体对菠菜绿叶粗蛋白作ＳＤＳ－ＰＡＧＥＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ后只有４００００±２０００－条染色带；作４％－２０％ＮＤ－ＰＡＧＥＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ后有多条染色带，Ｍｒ分别大约为４７００００、２８００００和８００００，表明菠菜绿叶中的ＧＯＩ有多个聚合态。

引用

页码：14 / 18

页数：5

共 8 条

[1]

菠菜中的乙醇酸氧化酶是一个同工酶[J] 徐杰中国生物化学与分子生物学报 1998, 06

[2]

菜心叶片中乙醇酸氧化酶的多种组分 [J].