第三方未成熟树突状细胞负载异体抗原诱导免疫耐受的实验研究

目的观察第三方未成熟树突状细胞(imDC)负载同种异体抗原后对其免疫特性的影响。方法从健康足月新生儿脐血中分离单核细胞,采用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM-SCF)和重组人白细胞介素(rhIL)4联合培养7 d,诱导其分化成imDC,并通过光学显微镜和扫描电镜观察细胞形态、检测细胞表型及混合淋巴细胞反应(MLR);将培养的细胞与异体淋巴细胞抗原共同孵育,并给予共刺激分子阻断剂细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白(CTLA-4Ig)处理,检测抗原负载前后的细胞表型变化,通过MLR比较致敏前后T淋巴细胞增殖的能力。结果 (1)培养后细胞具有典型的imDC特征,CD1α、CD83、CD80、CD86等成熟标志呈低表达,分别为 21．42％、0．59％、5．39％、3．85％;人类白细胞DR抗原(HLA-DR)的表达率为60．66％,MLR结果提示其不能刺激同种异体T淋巴细胞增殖。(2)负载抗原后的DC表现出成熟特性,CD1a、CD83、 CD80、CD86及HLA-DR表达明显增高,分别为65．51％、42．20％、56．45％、38．52％、76．44％(P< 0．05);能够刺激T淋巴细胞增殖[刺激指数(SI)>2．00]。(3)给予共刺激阻断剂CTLA-4Ig致耐处理后,SI由2．51下降到0．39,可明显抑制T淋巴细胞增殖。结论第三方imDC负载抗原后能表现出成熟特性;经CTLA-4Ig致耐处理,不能刺激未致敏T淋巴细胞增殖。有望诱导受体针对供者抗原的特异性免疫耐受。