用改进的DDRT-PCR技术进行人胚差异基因筛选

被引：27

作者：

苟德明

李文鑫

蒋达和

黄健

机构：

[1] 武汉大学生命科学学院!武汉,武汉大学生命科学学院!武汉,武汉大学生命科学学院!武汉,武汉大学生命科学学院!武汉

来源：

生物化学与生物物理进展 | 2000年 / 02期

关键词：

人胚胎; 发育; mRNA差异显示; PCR;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q522 [核糖（醣）核酸（RNA）];

学科分类号：

070307 [化学生物学];

摘要：

介绍一种从不同类型细胞或不同生长状态细胞中分离差异表达基因的快速高效mRNA差异显示技术 ,其特点是利用Ready To GoRT PCR反应珠和Ready To GoRAPD分析珠进行mRNA差异显示分析 ,使取样步骤降至最低程度 ,减少了潜在的取样误差和外源DNA污染 ,并确保每次反应的高度重复性 .通过银染测序胶分析差异显示的cDNA带 ,便于DNA回收和进一步克隆 .用此方法分析人胚发育早期不同阶段基因的差异表达 ,选用6条随机引物对 3、 4和 5周龄人胚进行mRNA差异显示分析 ,从 2 0 0 0多条带中共分离出 14个差异产物 ,经二次扩增及反向RNA印迹确证其中 6个片段为发育不同阶段差异表达基因

引用

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