荧光实时定量PCR检测非小细胞肺癌组织及外周血中RRM1 mRNA表达水平的方法

目的:建立检测非小细胞肺癌患者肿瘤组织及外周血RRM1 mRNA表达水平的实时定量荧光PCR方法,比较不同标本的检测方法及效果,为临床应用该基因表达水平预测药物疗效提供方法基础。方法:构建RRM1基因的质粒标准品,运用ABI7000PCR仪进行实时定量分析,探索最佳反应条件并建立标准曲线用以检测临床标本。结果:检测了18例患者的肺癌及正常肺组织标本,同时检测了17例患者的外周血标本,以β-actin为管家基因计算得肺癌组织相对表达量平均为4.46×10-3,正常肺组织为3.43×10-3,外周血为2.54×10-3。Ct值与模板起始浓度对数值之间有良好的线性相关。结论:所建SYBRGreenⅠ荧光定量PCR方法能成功检测肺癌组织及外周血单个核细胞RRM1 mRNA表达水平,检测方法基本相同,有较高的敏感性与特异性,可应用于临床检验工作。