牛疱疹病毒Ⅰ型二重LUX荧光PCR鉴别检测方法的建立

被引：8

作者：

陈茹 ^{[1
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刘琳琳 ^{[1
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曾彩云 ^{[2
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曾碧健 ^{[1
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罗琼 ^{[1
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曹永长 ^{[2
]}

毕英佐 ^{[2
]}

机构：

[1] 广东出入境检验检疫局

[2] 华南农业大学动物科学学院

来源：

中国兽医科学 | 2007年 / 11期

关键词：

LUX引物; 二重荧光PCR; 牛疱疹病毒Ⅰ型; 牛传染性鼻气管炎; 牛传染性化脓性外阴阴道炎;

D O I：

10.16656/j.issn.1673-4696.2007.11.004

中图分类号：

S854.44 [];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

采用LUX新型荧光PCR技术原理,建立了快速检测牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)以及鉴别野毒感染和基因缺失疫苗免疫动物的二重实时荧光PCR方法。结果显示,该方法对多株BHV-1病毒均呈典型gE、gC双基因阳性反应,对其他常见动物疱疹病毒以及健康牛基因组DNA等均呈阴性反应;对细胞增殖病毒液的gE、gC双基因鉴别的检测敏感性可达0.4～0.04 TCID50,比常规PCR方法高100倍以上;对带毒牛血清、抗凝全血、牛新鲜精液和冷冻精液基因鉴别的检测敏感性分别达0.04 TCID50、0.4 TCID500、.4 TCID50和4 TCID50。采用该方法从临床牛血样、鼻拭子样品中检出IBRV阳性样品,检测全程仅需约2 h。对单基因克隆质粒的检测进一步证实该方法能特异地鉴定gE、gC基因,检测灵敏度分别达90、30拷贝。结果表明,该方法可应用于临床快速诊断BHV-1病毒感染,鉴别BHV-1病毒感染与对应的基因缺失疫苗免疫动物。

引用

页码：944 / 949

页数：6

共 6 条

[1] Fluorogenic LUX primer for quantitation of HIV-1 by real-time RT-PCR [J].