c-myc反义寡脱氧核苷酸诱导人髓系白血病细胞系HL-60细胞凋亡

被引:7
作者
刘庭波
吕联煌
机构
[1] 福建省医科大学附属协和医院,福建省医科大学附属协和医院福建省血液学研究所福州,福建省血液学研究所福州
关键词
反义寡脱氧核苷酸; c-myc; 癌基因; 细胞凋亡; HL-60细胞; 人髓系白血病细胞系;
D O I
暂无
中图分类号
R733.7 [白血病];
学科分类号
摘要
为研究c myc硫代反义寡脱氧核苷酸对白血病细胞系HL 60诱导细胞凋亡的作用 ,将人工合成的长度分别为 18mer和 15mer的硫代反义寡脱氧核苷酸 (AspoⅠ和AspoⅡ )转染HL 60细胞 ,用流式细胞术检测c Myc蛋白及DNA倍体分析 ,RT PCR检测c mycmRNA水平 ,电镜观察凋亡细胞的超微结构 ,琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA降解片段。研究结果发现 ,经AspoⅠ 5 μmol L和 10 μmol L作用后c Myc蛋白分别降低 2 3.8%和 4 5 .4 % ,经AspoⅡ 10 μmol L作用后下降38.4 % ,RT PCR显示AspoⅠ和AspoⅡ组c mycmRNA表达明显减少。DNA倍体分析AspoⅠ 10μmol L作用 4 8和 72小时细胞凋亡率分别为 2 3.97%和 5 2 .6% ;AspoⅡ 10 μmol L作用 4 8和 72小时后细胞凋亡率分别为 2 8.8%和 4 5 .19% ;而空白对照和正义寡脱氧核苷酸组均未出现凋亡细胞。电镜观察两个反义寡脱氧核苷酸 10 μmol L作用后均出现细胞固缩 ,染色质边集 ,胞浆浓缩等凋亡细胞的改变。反义寡脱氧核苷酸 10 μmol L作用 4 8小时后均出现典型的DNA降解片段。本研究结果说明 ,c myc反义寡脱氧核苷酸是高特异性的基因药物 ,对HL 60细胞抑制c mycmRNA的表达 ,减少c Myc蛋白合成 ,并诱导HL 60细胞凋亡
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