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用不同方法把烟草花叶病毒RNA基因导入植物原生质体的研究
被引:6
作者:
袁天华
吴建华
龚祖埙
杨静平
林其谁
机构:
[1] 中国科学院上海生物化学研究所,中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室
来源:
关键词:
植物原生质体;
烟草花叶病毒;
电激法;
聚乙二醇法;
阳离子脂质体;
D O I:
暂无
中图分类号:
Q756 [遗传的调节控制(遗传代谢的调节控制)];
学科分类号:
摘要:
应用电激法和聚乙二醇法以及脂质体协调的上述两种方法对烟草和青菜原生质体进行烟草花叶病毒TMV-RNA的导入试验,并应用酶标免疫技术、电镜观察、半叶接种和十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)等方法对在原生质体中增殖的TMV进行鉴定。实验证明,虽然电激法和聚乙二醇法均能有效地将外源病毒基因导入植物原生质体,但经阳离子脂质体处理后的TMV-RNA,其转染效率可提高10倍以上。TMV在原生质体转染48小时后达到复制高峰。SDS-PAGE显示,原生质体转染48小时后,除出现TMV外壳蛋白明显条带外,尚有1条分子量在50~55kd蛋白质条带也明显增强。这些研究结果对植物遗传工程和抗病毒基因有种研究提供重要的数据和基础。
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