组织型纤溶酶原激活剂突变体Reteplase(r-PA)基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

被引:11
作者
廖建民
张瑾
沈子龙
机构
[1] 中国药科大学生物制药学院
[2] 中国药科大学生物制药学院 南京
[3] 南京
关键词
组织型纤维蛋白溶酶原激活剂(突变体); 聚合酶链式反应; 大肠杆菌表达;
D O I
10.19526/j.cnki.1005-8915.2002.02.009
中图分类号
Q785 [转化及克隆];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
通过PCR的方法从人t PA基因上扩增到r PA基因的编码序列 ,并克隆到 pMD18 T载体中 ,DNA测序与文献报道完全一致。该基因被克隆到多用途表达载体pET2 8a中 ,重组表达载体r PA/ pET 2 8a转化E coliBL2 1(DE3) ,培养表达 ,SDS PAGE分析可见Mr 约 390 0 0的蛋白条带 ,约占细胞内总蛋白的 30 %以上。体外溶圈法测定活性表明该重组蛋白具有较好的纤溶活性。
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[1]  
第三代溶栓药瑞替普酶[J]. 黄桢.国外医药(合成药 生化药 制剂分册). 1998(05)