采用自体成熟关节软骨细胞的软骨组织工程修复

目的探讨使成熟软骨细胞转化成代谢活跃、增殖迅速的再生软骨祖细胞,而后利用这种细胞构建自体源性工程组织,修复成熟关节软骨的缺损。方法成熟兔关节软骨细胞进行普通单层培养和转化生长因子(TGF)β1、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)联合诱导培养。培养细胞进行细胞计数、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测。将诱导培养的再生软骨祖细胞与聚乳酸载体(PDLLA)一道构建自体源性工程软骨,修复成熟关节软骨缺损。修复组织进行组织形态学和免疫组织化学研究。结果研究发现成熟关节软骨细胞在体外单层培养中增殖缓慢,而联合TGFβ1、bFGF诱导培养可促进成熟软骨细胞的增殖,10d内细胞增殖189倍。标准单层培养4～5代细胞经密集培养不表达Ⅱ型胶原,而联合细胞因子诱导培养6代的细胞在体外密集培养下,可很快恢复Ⅱ型胶原的表达。利用再生软骨祖细胞构建的自体源性工程软骨可修复软骨缺损,修复组织表达Ⅱ型胶原。结论成熟关节软骨细胞经TGFβ和bFGF联合诱导培养可形成再生软骨祖细胞,此细胞可用于构建自体源性工程组织,修复成熟关节软骨的缺损。