多重PCR结合基因芯片技术检测11种致病菌方法的建立

被引:19
作者
贺晨 [1 ]
孙鸿燕 [1 ]
邵丽筠 [2 ]
刘金华 [2 ]
张春秀 [3 ]
刘娅 [1 ]
机构
[1] 吉林大学公共卫生学院
[2] 吉林出入境检验检疫局
[3] 上海生物芯片有限公司
关键词
多重PCR; 基因芯片; 致病菌;
D O I
暂无
中图分类号
R446.5 [微生物学检验];
学科分类号
100208 ;
摘要
目的建立一种运用多重PCR方法结合基因芯片技术快速、准确检测11种常见致病菌的方法。方法筛选志贺氏菌、肠炎沙门氏菌、伤寒沙门氏菌、大肠杆菌O157、副溶血性弧菌、普通变形杆菌、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、产气荚膜梭菌、空肠弯曲菌的特异基因作为目的基因。设计相应的引物及探针,进行多重PCR扩增,制备寡核苷酸芯片。将多重PCR扩增产物与带有11种特异探针的基因芯片杂交。用扫描仪扫描,判定细菌种类。结果该基因芯片可特异性地检测11种致病菌,具有良好的特异性,基因组DNA检测灵敏度可达2×10-3ng。结论多重PCR结合基因芯片技术检测11种不同致病菌的方法特异性好,灵敏度高,具有较好的实用性。
引用
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