新生大鼠大脑皮质神经元原代培养方法的建立及其活性鉴定

被引:26
作者
梅莉 [1 ]
路浩 [1 ]
刘宗平 [1 ]
何玉琴 [2 ]
机构
[1] 扬州大学兽医学院
[2] 甘肃农业大学动物医学院
关键词
大脑皮质神经元; 原代培养; MTT; Nissl’s染色; 活性鉴定;
D O I
10.16656/j.issn.1673-4696.2007.03.018
中图分类号
Q813.11 [];
学科分类号
摘要
采用倒置相差显微镜、环境扫描电子显微镜对新生24 h内SD大鼠大脑皮质原代培养的神经元进行了形态学观察,建立了大脑皮质神经元原代培养方法。应用2.5μg/mL阿糖胞苷(Ara-C)对培养3 d的神经元进行24 h干预,去除神经胶质细胞、成纤维细胞、神经干细胞等杂质细胞,以提高神经元产率;用Nissl’s染色法进行神经元鉴定;利用微量滴定(MTT)法测定了一个培养周期(约10 d)的神经元活性分布。光学显微镜观察结果表明,培养至第4 h绝大多数神经元已贴壁生长,胞体上可见1~2个细小突起;培养至第3 d、第6 d时,Nissl’s染色结果显示,加Ara-C能显著提高神经元纯度(≥92%);MTT结合形态学观察结果表明,神经元培养至第6 d时活性最强,细胞呈卵圆形、蜘蛛状、锥体状等多种形态,细胞胞体饱满,光晕明显,神经网络形成完整。
引用
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页数:5
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