H5N1亚型禽流感病毒核蛋白NP的原核表达及抗体制备

被引：4

作者：

罗孟成

陶攀

肖庚富

潘兹书

机构：

[1] 武汉大学生命科学学院

来源：

中国人兽共患病学报 | 2008年 / 03期

关键词：

H5N1A型流感病毒; 核蛋白NP; 原核表达; 多克隆抗体;

D O I：

暂无

中图分类号：

R392 [医学免疫学];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的制备H5N1亚型禽流感病毒NP重组蛋白和抗体,为研制含NP组分的人禽流感亚单位疫苗和建立评价方法提供检测抗原和抗体。方法以H5N1亚型禽流感病毒A/chicken/Hubei/489/2004(H5N1)NP基因cDNA克隆质粒pMD-NP为模板,PCR扩增获得NP基因抗原区片段,克隆到原核表达载体pET-28a,构建重组质粒pET-ΔNP,转化大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIL,IPTG诱导重组蛋白表达。采用Ni亲和层析方法纯化NP重组蛋白,免疫家兔,收集免疫血清,ELISA测定抗体效价;间接免疫荧光检测所制备抗体与真核细胞表达NP蛋白的反应性。结果与结论成功的制备了高效价兔抗NP抗体,抗体效价在105以上,该抗体能与原核和真核系统中表达的NP蛋白特异性反应,为研制以NP蛋白为抗原组分的人禽流感亚单位疫苗和建立评价方法奠定了基础。

引用

页码：202 / 204+209 +209

页数：4

共 5 条

[1] 一株 H5N1亚型禽流感病毒的分离与鉴定 [J].