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含人γ-干扰素基因真核表达载体的构建及其在肝癌细胞中的表达
被引：11
作者：
郭英
杨丽新
王坤
闵军
陈积圣
机构：
[1] 中山医科大学附属第三医院外科,中山医科大学附属第三医院外科,孙逸仙纪念医院外科,孙逸仙纪念医院外科,孙逸仙纪念医院外科广东广州,广东广州,广东广州,广东广州,广东广州
来源：
关键词：
肝肿瘤/遗传学;
基因表达;
干扰素γ,重组;
肿瘤细胞,培养的;
D O I：
暂无
中图分类号：
R735.7 [肝肿瘤];
学科分类号：
100112 [医学生物化学与分子生物学];
摘要：
目的 构建含人γ -干扰素 (IFN -γ)基因的真核表达载体 ( pcDNA3-IFN -γ) ,并观察其在肝癌细胞株中的表达情况。方法 将IFN -γ的cDNA亚克隆于哺乳动物载体 ( pcDNA3)上 ,经脂质体介导将pcDNA3-IFN -γ导入人肝癌细胞株SMMC -772 1和QGY -770 1中 ,通过高剂量G418选择培养得出抗性克隆。RT -PCR检测IFN -γ基因在转染细胞内有无转录 ,ELISA法检测转染细胞内IFN -γ的表达水平。 结果 IFN -γ基因的mRNA仅存在于pcDNA3-IFN -γ导入的肝癌细胞内。其细胞培养上清液存在高水平的IFN -γ。 结论 含IFN -γ基因的真核表达载体能在肝癌细胞中稳定表达
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