区分禽流感病毒亚型诊断基因芯片的构建

被引：7

作者：

杨忠苹 ^{[1
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王秀荣 ^{[1
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石霖 ^{[1
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田丽娜 ^{[1
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王煜 ^{[2
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陶启蒙 ^{[1
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陈化兰 ^{[1
]}

机构：

[1] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物国家重点开放实验室

[2] 重庆出入境检验检疫局

来源：

中国动物检疫 | 2008年 / 25卷 / 10期

关键词：

禽流感; 基因芯片; 亚型鉴别;

D O I：

暂无

中图分类号：

S852.659.5 [];

学科分类号：

摘要：

制备了可同时区分AIVH5、H7、H9血凝素亚型及N1、N2神经氨酸酶亚型的基因诊断芯片。试验以重组质粒为模板,进行PCR扩增,然后用异丙醇沉淀法进行纯化,制备探针及内参基因。将探针及内参基因用点样缓冲液稀释到0.3μg/μL后用芯片点样仪将其点制到醛基化基片上,样点中心间距450μm,样点直径220μm。将点好的基片在室温干燥24h以上,后经65℃再水合10s、80℃干燥、65mj紫外线交联照射25min后,再用封闭液封闭,95℃变性处理,成功构建了能区分禽流感血凝素H5,H7,H9亚型及神经氨酸酶N1,N2亚型的检测基因芯片。在PCR扩增中标记待检样品,对制备的检测芯片进行质量检验,结果表明,制备的区分禽流感病毒亚型基因芯片可区分AIV部分亚型。

引用

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