小麦幼叶cDNA文库的构建

被引：10

作者：

吴耀荣

赵双宜

夏光敏

机构：

[1] 山东大学生命科学学院

来源：

山东大学学报(理学版) | 2003年 / 02期

关键词：

小麦; 幼叶; SMART; cDNA文库;

D O I：

暂无

中图分类号：

S512.1 [小麦];

学科分类号：

摘要：

提取小麦辉县红的三叶期幼叶总RNA ,利用RNA5’端模板转换技术 (SMART ,theSwitchMechanismAtthe 5’endofRNATranscript)合成cDNA的第一链 ,再经 2 1个循环的长距离PCR(LD PCR)合成双链cDNA ,经蛋白酶K消化、纯化cDNA、SfiI(A和B)酶切、过CHROMASPIN 4 0 0柱分级分离除去 4 0 0bp以下的小分子 ,与经过 5’端脱磷的λTriplEx2 Sfi(A和B) CIP载体进行连接 ,经体外包装和感染XL1 BLue宿主菌 ,得到了 1.0 0 5 6× 10 6 个独立的噬菌体克隆 .从中随机挑选 10 0个克隆进行PCR反应 ,电泳结果显示PCR产物大于 5 0 0bp的片段占 81% ,由此认为小麦幼叶cDNA文库已建立

引用

页码：101 / 104

页数：4

共 10 条

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