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人骨形成蛋白2A活性片段在大肠杆菌中的高效表达
被引：7
作者：
林松，徐印坎，李伯良
机构：
[1] 第二军医大学长征医院，中国科学院上海生物化学研究所
来源：
关键词：
骨形成蛋白；诱导成骨；软骨细胞；胶原组织;
D O I：
暂无
中图分类号：
Q342 [生化遗传学];
学科分类号：
摘要：
将编码人骨形成蛋白２Ａ（ＢＭＰ２Ａ）Ｃ端１７３个氨基酸（ＢＭＰ２３）和１３４个氨基酸（ＢＭＰ２４）的ＤＮＡ基因片段分别重组克隆进入ＰＬ启动子控制下的表达载体，构建了表达质粒ｐＢＬＢＭＰ２３和ｐＢＬＢＭＰ２４，分别转化大肠杆菌进行表达研究．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析温敏诱导的表达菌，可以分别观察到分子量为２０ｋＤ和１５．５ｋＤ的高表达条带，与理论计算的分子量一致，表达量分别占细菌蛋白质总量的１０％和２０％左右。表达产物经包含体制备达到８０％以上纯度。Ｎ端序列测定的１５个氨基酸，与重组ｃＤＮＡ基因编码的序列相同．ＢＭＰ２３和ＢＭＰ２４包含体经复性处理后，得到二聚体分子蛋白质条带，与骨基质胶原重组后在大鼠体内测活，观察到ＢＭＰ２３诱导软骨细胞生成，ＢＭＰ２４刺激丰富的骨样胶原组织合成．
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