富含半胱氨酸蛋白61对人肾小管上皮细胞增殖与细胞周期的影响

被引:6
作者
徐岩 [1 ]
沈学飞 [2 ]
宋年华 [1 ]
吴道诩 [1 ]
机构
[1] 青岛大学医学院附属医院肾内科
[2] 解放军第四零一医院崂山分院肾内科
关键词
细胞增殖; 细胞周期; 黏着斑蛋白酪氨酸激酶类; 细胞周期蛋白质依赖激酶类; Cyr61蛋白; 肾小管上皮细胞;
D O I
暂无
中图分类号
R692 [肾疾病];
学科分类号
100221 [泌尿外科学];
摘要
目的观察富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)蛋白对人肾小管上皮细胞(HK-2)增殖与细胞周期的影响。方法细胞被分为空白对照、阴性对照和Cyr61转染组。克隆Cyr61cDNA,构建pEGFP-N2-Cyr61重组质粒,利用脂质体分别将重组质粒与pEGFP-N2空质粒瞬时转染HK-2。四唑盐比色实验(MTT)检测细胞增殖;流式细胞分析术检测转染效率和细胞凋亡率;Westein印迹法检测Cyr61蛋白、磷酸化黏着斑激酶(p-FAK)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达。结果 pEGFP-N2-Cyr61重组质粒可高效转染HK-2细胞。与空白对照、阴性对照组相比,Cyr61转染组细胞和培养液中的Cyr61蛋白表达量显著提高,细胞增殖活力明显增强,细胞中G1时相的比例显著减少,S时相显著增加,细胞凋亡率下降(均P<0.01)。Cyr6l转染组细胞中p-FAK、CDK2表达量亦显著提高(P<0.01)。结论高表达的Cyr61蛋白可通过FAK途径促进CDK2表达,从而促进HK-2细胞进入S期,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡。
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