高效液相色谱评价血清胆固醇试剂中酶的性能

为了评价国内市场上血清胆固醇试剂中胆固醇酯酶（ＣＥＨ）和胆固醇氧化酶（ＣＯＤ）的性能，设计了测定反应液（血清加试剂）中未被水解的胆固醇酯（ＵＨＣＥ）和未被氧化的游离胆固醇（ＵＯＦＣ）的方法。该法用正己烷提取未经皂化的和皂化的反应液中的游离胆固醇，衍生为苯氨基甲酸酯，高效液相色谱测定其含量。未经皂化的反应液中的游离胆固醇是ＵＯＦＣ，皂化后的反应液中的游离胆固醇是ＵＯＦＣ与ＵＨＣＥ之和，从中减去ＵＯＦＣ即为ＵＨＣＥ。用此法检查了１２种国产和进口试剂盒，多数试剂的ＣＯＤ和ＣＥＨ性能良好，少数较差，表现为反应液中ＵＨＣＥ较高，其中有２种试剂为１％～２％，２种为２％～４％，１种高达５．４％，ＣＥＨ是影响试剂性能的主要因素。该法可以有效地鉴定胆固醇试剂中两种酶的性能是否能达到要求。