胎鼠表皮干细胞的分离培养及毛囊再生研究

目的　分离培养胎鼠的表皮干细胞及毛囊乳头层细胞 ,通过动物模型观察两者复合移植后 ,上皮形成及毛囊的再生情况。　方法　采用IV型胶原分离培养胎鼠表皮干细胞 ,检测 β1整合素及角蛋白 15的表达水平 ,测定其细胞周期及克隆形成率 (以角质细胞为对照 ) ;分离培养毛囊乳头层细胞 ,并接种在纤维蛋白胶中 ,与表皮干细胞膜片复合形成全层皮肤等同物 ,移植在裸鼠全层皮肤缺损创面作为实验组 ,同时将胎鼠成纤维细胞替代乳头层细胞作为对照组 ,8～ 10周后观察创面及毛囊的组织学变化。　结果　胎鼠表皮干细胞表达高水平的 β1整合素及角蛋白 15 ;细胞周期分析显示 ,G1期细胞百分率为 94.9% ,S期为 3.5 % ,提示为慢循环细胞周期 ;角质细胞的G1期细胞百分率为 74.1% ,S期为 17.5 % ;表皮干细胞的克隆形成率为 15 3 % ,明显高于对照组的 6 7% ;裸鼠创面愈合后 8～ 10周 ,实验组可见新生毛囊形成 ,对照组未见到此现象。　结论　能初步实现对胎鼠表皮干细胞的体外分离培养 ;在毛囊乳头层细胞的诱导下 ,胎鼠表皮干细胞可参与形成新的毛囊结构。