猪α干扰素基因在毕赤酵母中的分泌表达

被引:27
作者
葛丽
李震
于瑞嵩
刘惠莉
张德福
周智爱
尹逊和
机构
[1] 上海市农业科学院畜牧兽医研究所
[2] 山东农业大学动物科技学院 上海
[3] 山东农业大学动物科技学院
[4] 山东泰安
[5] 上海
[6] 上海市农业遗传育种重点实验室
关键词
猪干扰素; 毕赤酵母; 表达;
D O I
10.16303/j.cnki.1005-4545.2005.03.020
中图分类号
Q786 [基因的表达];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
将猪α干扰素(PoIFN-α)基因克隆入毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA中,电转化毕赤酵母KM71H菌株,抗生素ZeocinTM浓度梯度筛选高抗性转化子,以PCR鉴定阳性重组菌株。筛选出的高拷贝重组菌株分别通过BMGY/BMMY培养基和YPG培养基,用甲醇诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot印迹杂交结果证实,表达产物为重组PoIFN-α融合蛋白,经细胞毒性试验检测(WISH/VSV系统),表达产物的抗病毒活性为4.1×104IU/mL。
引用
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共 1 条
[1]   Recombinant protein expression in Pichia pastoris [J].
Cregg, JM ;
Cereghino, JL ;
Shi, JY ;
Higgins, DR .
MOLECULAR BIOTECHNOLOGY, 2000, 16 (01) :23-52