核酶基因转化番木瓜的研究

利用核酶（Ribozyme，Rib．）基因转化番木瓜（CaricapapayaL．）探索培育抗番木瓜环斑病毒（PapayaRingspotVirus，PRV）品种的新途径。用三亲交配法将切割PRVRNA的Rib．基因的表达载体（P35s／NPTⅡ，Rib．）转入农杆菌LBA4404，采用农杆菌介导转化将Rib．基因和NPTⅡ基因导入番木瓜细胞的核基因组中。其培养的外植体在含有Kan．100μg／mL，Carb．500μg／mL的选择培养基上产生抗性的愈伤组织，并通过体胚途径再生植株。经DNAdotblot，Southernblot分子杂交检测证明，Rib．基因已整合到番木瓜再生植株的核基因组中。RNAdotblot分析和攻毒试验结果表明，核酶基因在转基因植株中获得了表达，转基因番木瓜植株对PRV具有一定的抗性。