猪轮状病毒的细胞培养特性与FQ-PCR检测方法的建立

被引：4

作者：

魏锁成 ^{[1
]}

巩转娣 ^{[2
]}

宋昌军 ^{[1
]}

机构：

[1] 西北民族大学生命科学与工程学院

[2] 西北民族大学医学院附属医院

来源：

中国兽医学报 | 2011年 / 31卷 / 03期

关键词：

轮状病毒; MA-104细胞; 实时荧光定量PCR; 猪;

D O I：

10.16303/j.cnki.1005-4545.2011.03.032

中图分类号：

S852.65 [家畜病毒学];

学科分类号：

090601 ;

摘要：

为了探讨动物轮状病毒的细胞培养特性和分离方法,建立FQ-PCR检测方法,旨在为研发诊断试剂盒和疫苗奠定基础。37℃5%CO2下用细胞培养液C培养ELISA检测的阳性猪粪便样本,观察细胞形态的变化;用RV感染MA-104细胞,分离纯化病毒,测定VP6基因序列并分析其同源性,在普通PCR和实时定量PCR的基础上,建立FQ-PCR检测方法。结果,MA-104细胞培养的最佳条件为37℃5%CO2;接毒后18 h出现细胞膜缩融合、细胞层裂开、细胞核固缩及空泡化等明显的细胞病变（CPE）,CPE达到90%时可收毒;分离到1株猪轮状病毒（暂命名为GSPRV01株）,得到VP6为1 200 bp,与标准株（AV-55）的同源性为88.50%。

引用

页码：373 / 377

页数：5

共 17 条

[1] 不同代次牛肾原代细胞培养轮状病毒的比较研究 [J].