肺腺癌细胞系耐药及凋亡相关基因的表达和逆转

目的　探讨顺铂耐药肺腺癌细胞系A549DDP的耐药、凋亡相关基因的表达及其与亲代细胞A549 的差异,观察差异表达基因的反义寡核苷酸的逆转作用。方法　将人工合成的反义、正义硫代脱氧寡核苷酸(S oligodleoxynucleotide ,S ODN) 经脂质体包裹后转染A549DDP细胞,应用RT PCR 检测耐药及凋亡相关基因mRNA 水平,免疫细胞化学及流式细胞 抗体(FCM Ig) 检测相应蛋白及核增殖抗原Ki 67 表达,MTT检测其耐药性改变,TUNEL、DNA 电泳检测细胞凋亡。结果　A549DDP细胞多药耐药基因( MDR1) 、拓朴异构酶Ⅱ(TOPOⅡ) 、c myc mRNA 及蛋白表达水平接近A549 ,二者c erbB 2 均阴性。A549DDPbcl 2 阳性,且MRP mRNA 及蛋白水平较A549 高。bcl 2 、MRP 反义S ODN 可相应地抑制bcl 2 、MRP、c myc 表达,降低A549DDP耐药性,抑制其生长与增殖,促进细胞凋亡。结论　肺腺癌A549 细胞获得顺铂抗药性,与bcl 2 和MRP基因高表达有密切关系。