热休克蛋白90α对静脉淤血型皮瓣缺血再灌注损伤的实验研究

目的探讨局部应用外源性热休克蛋白90α(以下简称HSP90α)功能基因"F-5",对大鼠静脉淤血型皮瓣缺血再灌注损伤模型皮瓣成活率的影响。方法通过携带pet15b-F-5重组质粒的构建、大肠杆菌细胞培养扩增,以及HSP90α"F-5"基因表达蛋白的纯化,获得外源性HSP90α;以大鼠腹壁浅血管束为蒂设计轴型皮瓣。将大鼠随机分为3组(每组20只):A组为空白对照组;B组为HSP90α预处理组;C组为HSP90α治疗组。每组又分为2个亚组,根据再灌注时间点分为缺血6 h亚组和缺血8 h亚组。模型建立过程中采用激光多普勒血流仪检测皮瓣血流灌注量,术后每天观察皮瓣的颜色、皮纹、质地、毛发生长、毛细血管充盈试验、针刺出血情况等;比较3组皮瓣的成活率、病理组织学变化以及微血管密度等指标。结果 B组在静脉阻断过程中和再灌注后,皮瓣的血流灌注量较其他2组高;术后7 d,A组皮瓣成活率为(19.3±3.8)%,B组为(85.6±17.6)%,C组为(78.9±20.5)%;B组皮瓣的成活率最高(P<0.05)。术后1、3、7、10、14 d观察,B组及C组皮瓣的炎性细胞浸润较A组明显减少,血管内较少有血栓形成,成纤维细胞及血管内皮细胞增殖显著,新生血管密度增加明显;且缺血6 h亚组的参数均优于8 h亚组。结论建立轴型皮瓣静脉淤血型缺血再灌注损伤大鼠模型,将阻断静脉的时间控制在6 h为宜;外源性HSP90α"F-5"表达蛋白可增加皮瓣血流再灌注量,降低细胞渗透,促进新血管形成,从而对静脉淤血型皮瓣缺血再灌注损伤有较好的治疗作用,而且提前干预的效果更优。