内毒素/脂多糖及烧伤血清对豚鼠肠道平滑肌细胞离子通道的影响

目的观察内毒素/脂多糖（LPS）及烧伤血清对豚鼠结肠带平滑肌细胞钙激活钾通道（KCa）的影响,探讨烧伤后发生胃肠动力障碍的分子电生理机制。方法用急性酶分离法获取单个健康豚鼠结肠带平滑肌细胞,在对称性高钾溶液中采用细胞膜片钳单通道记录技术,分别记录细胞贴附式膜片（电极位于细胞膜外面）和内面向外式膜片（电极位于细胞膜内面）上的电流。引出的电流信号经转换器转换,输入计算机,用离子通道计算机分析系统进行数据处理,并测定以下指标：（1）电流幅值（CA）；（2）开放概率（PO）；（3）开放时间（OT）；（4）关闭时间（CT）,以检测其特性并鉴定是否为KCa。确定为KCa后,向浴液中分别加入20、40、60、80、100 mg/L的LPS,观察LPS对两种膜片方式上KCa的影响。在浴液中分别加入正常血清和烧伤血清,观察血清对KCa的影响。结果在对称性高钾溶液中,豚鼠结肠带平滑肌细胞内面向外式膜片上的KCa电导值为（271±7）ps,是高电导的离子通道。随着膜去极化及细胞内Ca2+增加,通道PO增加,该通道可被细胞外低浓度的钾通道阻断剂四乙胺（TEA,1 mmol/L）所阻断,而膜内面较高浓度的TEA（40 mmol/L）对该通道无阻断作用,证实为KCa。当Ca2+为0 mol/L时,向浴液中分别加入20、40、60、80、100 mg/L的LPS,两种膜片方式KCa活性随LPS浓度的增加而增加。40 mg/L以上的LPS对KCa具有明显激活作用,通道PO显著增加（P＜0．05或0．01）,用不含LPS的浴液灌流后亦不能回转。两种膜片方式下烧伤血清对KCa有激活作用,而正常血清无此作用。结论LPS和烧伤血清可通过激活肠道平滑肌细胞KCa抑制肠道蠕动。