β-淀粉样蛋白片段31～35 诱导体外皮质神经元凋亡的时程观察和相伴随的某些基因的表达变化(英文)

在过去工作证实人工合成的β 淀粉样蛋白片段３１～３５（Ａβ３１～３５）诱发体外培养的新生小鼠大脑皮质神经元凋亡的基础上，本研究探讨了这一凋亡的详细时程和一些相关基因表达的变化。结果显示：（１）用荧光细胞核染料ＰＩ染色，观察到Ａβ３１～３５ 处理后１ ｈ 开始出现神经元核染色质凝聚，２ ｈ 可看到核沟出现和大小不等的核片块，在３，４ 和２４ ｈ 出现越来越多的核片块，但不同细胞核的变化不同步，即有些细胞出现核损害的同时，也有核正常的细胞存在；（２）用琼脂糖凝胶电泳分析各时间点提取的ＤＮＡ，梯型现象最早出现在Ａβ３１～３５ 处理后２ ｈ，随着时间延长越来越明显；（３）用流式细胞仪检测ＤＮＡ 含量直方图显示，亚二倍体细胞最早出现在Ａβ３１～３５ 处理后２ ｈ，其数量随时间延长逐渐增多；（４）用免疫荧光流式细胞仪检测某些基因编码的蛋白产物的表达量表明，ｂｃｌ ２ 蛋白表达在Ａβ３１～３５ 处理后１ ｈ 出现明显减少，以后缓慢降低，至２４ ｈ达最低点。与此相反，ｂａｘ 蛋白表达在１～４ ｈ 期间呈现稳定上调，而ｐ５３ 和ｃ ｆｏｓ 两种蛋白表达也显示上调，其ｐ５３ 蛋白在２ ｈ 达最高峰，ｃ ｆｏｓ 蛋白则在２ ｈ 开始上调；（５）用ＲＴ ＰＣＲ