兔肾脏DDAH活性测定方法的研究

被引：4

作者：

秦俭

陈运贞

涂植光

机构：

[1] 重庆医科大学临床学院心内科

[2] 重庆医科大学临床学院检验系

来源：

中国药理学通报 | 2003年 / 03期

关键词：

兔; 肾脏; 二甲基精氨酸二甲基氨基水解酶; 非对称性二甲基精氨酸; 方法;

D O I：

暂无

中图分类号：

R965 [实验药理学];

学科分类号：

摘要：

目的　建立日本大耳白家兔肾脏二甲基精氨酸二甲基氨基水解酶 (DDAH)活性的检测方法。方法　空气栓塞处死正常日本大耳白家兔后 ,取出肾脏并制备匀浆 ,以非对称性二甲基精氨酸 (ADMA)为底物 ,用UV 2 6 5型分光光度计在 5 2 5nm下测定生成L 胍氨酸 (L Cit)的量 ,不同条件下比较 ,筛选最适条件 ,并计算DDAH降解ADMA的酶促反应动力学参数。结果　DDAH降解ADMA的酶促反应动力学参数为Km =(0 2 8± 0 10 )mmol·L-1,Vm =(1 36±0 4 2 )mmol·L-1·g-1·min-1。本实验选定的兔肾DDAH活性检测最适条件为 :酶蛋白浓度 12g·L-1、缓冲液最适pH7 4、ADMA终浓度 2mmol·L-1、反应时间 30min。结论　本法简便易行 ,且以Km 值作为确定酶促反应底物浓度的依据 ,有利于准确检测该酶活性

引用

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