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- [1] 变态反应学实验技术.[M].乔秉善编著;.中国协和医科大学出版社.2002,
- [2] 蛋白质电泳实验技术.[M].郭尧君编著;.科学出版社.1999,
- [3] 变态反应学.[M].叶世泰主编;.科学出版社.1998,
艾蒿花粉主要变应原的分离、纯化与鉴定
被引：16
作者：
杨慧
刘志刚
韩庆国
侯穗波
梁桂珍
机构：
[1] 深圳大学生命科学院
[2] 深圳市第一人民医院
[3] 深圳市第一人民医院
来源：
关键词：
艾蒿花粉;
SDSPAGE;
Westernblot;
离子交换层析;
凝胶层析;
D O I：
暂无
中图分类号：
R392 [医学免疫学];
学科分类号：
100102 ;
摘要：
目的 对我国蒿属花粉中常见、重要的变应原艾蒿花粉进行分离、鉴定与纯化。方法采用不同的提取液得到艾蒿花粉粗浸液 ,经饱和 (NH4 ) 2 SO4 分级沉淀后用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)分离蛋白质组分 ,并用凝胶成像系统测定各组分的相对分子质量 (Mr) ;采用Westernblot鉴定其主要及次要变应原 ;通过DEAE CelluloseDE 32离子交换层析 (ionexchangechromatography ,IEC)和SephadexG 75凝胶层析 (gelchromatography)对艾蒿花粉变应原进行纯化。结果 分离后得到 2 0多种蛋白质组分 ,其中Mr 为 5 8× 1 0 3、38× 1 0 3、2 5× 1 0 3、2 0× 1 0 3、1 6× 1 0 3等 5个条带蛋白含量最丰富 ;分离到的蛋白质组分中有 9种蛋白能与确诊的蒿属花粉过敏患者血清中蒿属花粉特异性IgE结合 ,其中Mr 为 6 2× 1 0 3、4 3× 1 0 3、38× 1 0 3的蛋白条带的结合率最高 ;经纯化后仅得到Mr 为 6 2× 1 0 3的主要变应原。结论 艾蒿花粉的主要变应原Mr 分别为 6 2× 1 0 3、4 3× 1 0 3和 38× 1 0 3,层析技术可以对Mr 为6 2× 1 0 3的主要变应原成分进行纯化。
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