肝片吸虫抗原基因的克隆与筛选附视频

被引:3
作者
张西玉
徐恒
吴峰
郑莉
机构
[1] 乐山师范高等专科学校!乐山
[2] 四川大学生命科学学院!成都
关键词
肝片吸虫; 抗原基因; 克隆;
D O I
暂无
中图分类号
Q785 [转化及克隆];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
提取肝片吸虫总RNA ,经oligo(dT) 纤维素柱分离得到mRNA ,反转录合成cDNA后 ,连接EcoRI人工合成接头 ,酶切后克隆到表达型质粒载体 pGEX 1λT ,转化大肠杆菌JM1 0 7菌株构建肝片吸虫cDNA文库 (文库大小约为 2 .1× 1 0 5) .用免疫印迹筛选出 5个阳性克隆 ,分别命名为 :pFH2 ,pFH4 ,pFH1 6,pFH2 1和 pFH2 9.其中 pFH2 1印迹信号最强 .EcoRI酶切pFH2 1显示 :插入片段大小约为 1 .0kb .重组子 pFH2 1经SDS PAGE电泳显示 :表达有一个重组蛋白 ,分子量约为 4 8kD .
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