目 的 研 究 脂 质 体 介 导 角 蛋 白 K14 反 义 寡 核 苷 酸 (ASODN )阻 遏 人 角 质 形 成 细 胞 K14 基因 和 蛋 白 的 表 达 及 抑 制 体 外 增 殖 活 性 的 效 果 。 方 法 人 表 皮 角 质 形 成 细 胞 原 代 培 养 ,3 ￣ 10 代 用 于 实验 ,利 用 脂 质 体 将 人 工 合 成 的 正 义 、反 义 及 错 配 K14 寡 核 苷 酸 基 因 片 段 导 入 角 质 形 成 细 胞 ,应 用 流 式 细胞 仪 、逆 转 录 聚 合 酶 链 反 应 (RT-PCR )和 免 疫 组 化 (SABC )方 法 检 测 反 义 寡 核 苷 酸 对 角 质 形 成 细 胞 的 细胞 周 期 、K14 基 因 和 蛋 白 表 达 的 影 响 。结 果 脂 质 体 介 导 的 K14 反 义 寡 核 苷 酸 转 染 角 质 形 成 细 胞 后 ,能有 效 地 抑 制 角 质 形 成 细 胞 中 K14 基 因 的 表 达 ;48 h 后 可 阻 遏 K14 蛋 白 表 达 ;流 式 细 胞 仪 检 测 见 反 义 寡核 苷 酸 处 理 组 细 胞 周 期 发 生 明 显 改 变 ,G 期 细 胞 百 分 率 上 升 ,S 期 细 胞 百 分 率 下 降 。 而 正 义 寡 核 苷 酸 1组 、错 义 寡 核 苷 酸 组 及 空 白 对 照 组 均 无 此 变 化 。 结 论
