眼镜蛇血清解毒蛋白基因的分子克隆和序列分析

既往研究中作者发现，眼镜蛇血清解毒蛋白（ＣＳＡＰ）经胰蛋白酶水解后纯化所得的几个肽段中，至少在一３９肽显示其序列与大鼠血清白蛋白相关。为进一步弄清ＣＳＡＰ的毒素结合活性与其相应的分子结构关系，以眼镜蛇肝细胞建立了ｃＤＮＡ文库，借已知的胰蛋白酶水解ＣＳＡＰ所得的肽段氨基酸序列设计了一组ＰＣＲ引物。采用ＰＣＲ扩增方法从文库中筛选得ＣＳＡＰ特异性克隆，测定了ＣＳＡＰ全ｃＤＮＡ序列，然后推导出ＣＳＡＰ氨基酸序列。并得知ＣＳＡＰ为一由６１４个氨基酸残基组成的单一多肽链，分子量６９８００。根据其全序列的结构特征，尤其是其信号肽与已知的几种哺乳动物白蛋白的信号肽序列非常一致，其中半胱氨酸残基的分布规律也与其他血清白蛋白非常相似，可确认ＣＳＡＰ即为眼镜蛇血清白蛋白（ＣＳＡ）。