Tet调控的EB病毒LMP1基因导入鼻咽癌细胞系表达的研究

本文利用Ｔｅｔ ｏｎ基因表达系统建立了一株可诱导ＥＢ病毒ＬＭＰ１基因表达的鼻咽癌细胞株。首先将Ｔｅｔ ｏｎ基因调控系统的调节质粒ｐＴｅｔ ｏｎ导入鼻咽癌细胞系ＨＮＥ２中，用ｒｔＴＡ反应性荧光素酶报道基因ｐＴＲＥ ｌｕｃ挑选高诱导、低背景的克隆，第二轮转染将构建的反应质粒ｐＴＲＥ ＬＭＰ１导入得到稳定转染的阳性克隆，对各克隆用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹方法进行强力霉素（Ｄｏｘ）诱导效应检测，其中Ｌ７对Ｄｏｘ具有较好的剂量反应依赖性，诱导表达量可增加１０倍左右。ＬＭＰ１在鼻咽癌细胞可调表达对于分析其不同程度的表达在鼻咽癌发生中的作用具有重要价值。