反向杂交法检测23种人乳头瘤病毒型别的研究

目的建立一种同时检测人乳头瘤病毒(HPV)5种低危型和18种高危型的反向杂交方法。方法将23种 HPV 型别(低危型:HPV6、11、42、43和44型,高危型:HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83和 MM4型)特异性探针固定于尼龙膜条上,生物素标记的通用引物介导 PCR(GP-PCR)扩增 HPV DNA,扩增产物与膜条经反向杂交检测 HPV 型别,并与 HC-Ⅱ法及扩增和测序法平行检测136例临床标本,对检测结果进行对比。结果 3种方法 HPV 阳性检出率分别为41.9%、42.6%和40.4%;反向杂交法与后二者检测结果之间均具有良好一致性(Kappa 值分别为0.8644和0.9089);以扩增和测序法为金标准,反向杂交法检测敏感度、特异度和准确性分别为96.36%、95.06%、95.59%。结论本法能一次性检测23种 HPV 具体型别,敏感度、特异度高,操作简便,结果易于判读,适合临床应用。